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Acer 30-32. 08038 BARCELONA |
Columnas SIELC para HPLC
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Columnas SIELC para HPLC |
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PRIMESEP |
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Las Fases
Primesep ofrecen una selectividad nunca antes posible en la separación
de un amplio rango de compuestos en múltiples aplicaciones. Durante décadas el diseño de la fase estacionaria en cromatografía líquida ha sido dominado por la idea de la eliminación de las interacciones múltiples "no deseadas" que suceden en las separaciones de modo mixto. Así en cromatografía de fase reversa se ha hecho mucho hincapié en la eliminación de las interacciones silanol con compuestos amínicos al desarrollar las fases desactivadas para bases. En la misma línea, las interacciones de adsorción se consideran no deseables como contrarias a las interacciones estéricas en cromatografía de exclusión, las interacciones no iónicas se ven en general como complicaciones en la cromatografía de intercambio y exclusión iónica. Sin embargo es posible beneficiarse de interacciones múltiples de la fase estacionaria. SIELC Technologies introduce las columnas para HPLC Primesep®, especialmente diseñadas para separaciones en modo mixto capaces de separar una tremenda gama de compuestos con diferentes técnicas basadas en la selección de la fase móvil. |
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| Modo Mixto Ácido | Modo Mixto Básico | Modo Mixto Complejo | Modo Mixto Fenil | ||||||||||||||||||
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| Columnas con grupos funcionales de carga negativa debido al reactivo de par iónico aniónico incrustado. | Columnas con grupos funcionales cargados positivamente | Columnas con selectividad única sin equivalencia |
Tres Interacciones en
columna: Fase Reversa, p-p, Intercambio Catiónico Fuerte. |
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Primesep A La fase ácida más fuerte Primesep 100 Fase ácida fuerte Primesep 200 Fase ácida media Primesep C Fase ácida media-débil Primesep 500 Fase ácida débil |
Primesep B Fase básica fuerte para TFA, ácido fosfórico o perclórico en la fase móvil Primesep B2 Fase básica débil para fases móviles tamponadas con acetato amónico Primesep D Para análisis de plasma Primesep AB Para cationes y aniones |
Primesep C Propiedades combinadas de fase reversa y formación de complejos para interacción con aminas e iones sulfonio, fosfonio y metales |
Primesep P La fase de elección en la separación de isómeros estructurales y compuestos aromáticos |
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Intercambio Catiónico SIELC
Technologies ofrece varias columnas diferentes con grupos funcionales
cargados negativamente por el reactivo de par iónico aniónico
incrustado. Primesep A es la fase ácida más fuerte mientras que Primesep
100 y 200 son intermedias. Las diferencias en la actividad del grupo
funcional permite seleccionar la columna más adecuada para un grupo
particular de compuestos básicos que difieran en su pKa.El grupo funcional ácido incrustado pede estar en forma ionizada o no ionizada, en función del pH de la fase móvil. Para obtener retención por mecanismo de intercambio iónico en las columnas Primesep, el pH de la fase móvil ha de seleccionarse cercano o superior al valor de transición de los grupos ácidos incrustados. Por debajo del valor de pH de transición, la columna se comporta como una fase reversa normal con un grupo polar incrustado no ionizado. El nombre de la columna corresponde al pH de la fase móvil en el que el residuo ácido de la columna pasa de la forma ionizada a la neutra. |
Intercambio Aniónico SIELC
Technologies ofrece 4 tipos de columnas tipo B con grupos funcionales
cargados positivamente. Primesep B en una fase fuertemente básica. El
rango de pH recomendado es de 1.5 a 4 creado con TFA, ácido fosfórico,
perclórico o fórmico en la fase móvil. Primesep B2 es una fase
básica débil que también tiene grupos funcionales carboxílicos ácidos. A
un pH de la fase móvil por debajo de 5 los grupos ácidos no están
ionizados y en la superficie de Primesep B2 se generan cargas positivas.
Esta química dual ofrece un rango de pH entre 0.5 y 7, adecuado para
fases móviles tamponadas con formiato o acetato amónico.Primesep D, originalmente desarrollada para análisis directo de plasma, se ha vuelto muy útil para otras aplicaciones de intercambio aniónico/fase reversa. Tiene un rango de pH de 1.5 a 7 y ofrece propiedades similares a Primesep B2, pero al no tener grupos carboxílicos, se mantienen cargada positivamente en todo el rango de pH. La cuarta columna, que ofrece propiedades de intercambio aniónico es Primesep AB, que también tiene propiedades de intercambio catiónico y resulta útil en la separación de mezclas complejas de compuestos polares aniónicos y catiónicos. Todas las columnas tipo B ofrecen al menos dos interacciones principales con los analitos: fase reversa e intercambio aniónico. Los compuestos neutros son retenidos por interacción de fase reversa. La presencia de un grupo ionizado en la cadena alquílica ofrece selectividad adicional no común el las columnas de fase reversa. Los analitos ácidos se pueden retener tanto por mecanismos de fase reversa como de intercambio. Para controlar la retención y la selectividad se puede emplear una amplia selección de fases móviles con concentraciones de modificador orgánico entre 0 y 100%. La concentración y tipo de un ácido afectará también la retención de compuestos aniónicos. Los compuestos básicos pueden retenerse sólo mediante mecanismos de fase reversa, pero la presencia de grupos cargados positivamente tanto en el analito como en la fase estacionaria produce una selectividad única debido a fenómenos de exclusión iónica.  Las columnas Primesep B retienen los residuos ácidos en cantidades equimolares. Cuando en una columna se cambia a otra fase con otro tipo de ácido ha de equilibrarse suficientemente para substituir los contraiones de la fase móvil anterior con el nuevo contraión. |
Interacción Compleja Orden
de elución único de moléculas cargadas positivamente en un sistema HPLC
quelante. SIELC Technologies ha desarrollado una nueva clase de columnas
con interacciones combinadas de fase reversa, intercambio catiónico y
formación de complejos para interacción con aminas e iones sulfonio,
fosfonio y metales.El rango de pH de estas columnas es de 1 a 7, pero sus propiedades de formación de complejos y de intercambio catiónico se suprimen substancialmente por debajo de pH 3. Para facilitar la formación de complejos el pH de la fase móvil ha se mantenerse en el rango de 3 a 7. El grado de formación de complejos puede ajustarse seleccionando el pH de la fase móvil.  Estas propiedades complejantes únicas pueden observarse en la separación de metales alcalinos. Los metales eluyen en Primesep C en orden inverso al que se obtiene en la elución de intercambio iónico. Este orden inusual también se da en aminas primarias, secundarias y terciarias. Éstas últimas tienen pKa mayores que las primarias por lo que se retienen más en los mecanismos de intercambio iónico. |
Interacción
p-p SIELC
Technologies ha desarrollado una nueva clase de fases estacionarias que
ofrecen tres tipos de interacción:
Según las propiedades
del analito, una, dos o las tres interacciones pueden aplicarse en la
separación.
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| Publicaciones Disponibles en Primesep | |||||||||||||||||||||
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OBELISC |
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| Dos columnas complementarias, Obelisc R y Obelisc N, basadas en la tecnología LiSC ™ (Liquid Separation Cell), ofrecen un nuevo enfoque para separar una amplia variedad de pequeñas moléculas. Los tres parámetros principales de la fase móvil que permiten el ajuste de las propiedades de la columna son la concentración de tampón, el pH del tampón, y la concentración del modificador orgánico. | |||
| ¿Qué es la Tecnología LISC? | |||
LiSC
- Living Separation Cell
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| Las tres características principales de la celda la hacen diferente a los materiales cromatográficos tradicionales | |||
| Una fuerza iónica en la celda significativamente mayor que la de la fase móvil, permitiendo una transferencia de masa rápida de los analitos cargados dentro y fuera de la celda aún con baja concentración de tampón en la fase móvil. | La fase estacionaria ocupa el volumen entero de la celda, no sólo las paredes como en otras fases estacionarias, permitiendo una elevada capacidad de carga de la fase. | Las cargas positivas y negativas del ligando de la celda separadas por una larga cadena orgánica permiten que tanto las cargas positivas y negativas participen simultáneamente en la interacción electrostática. | |
| Dos fases, Obelisc N y Obelisc R que substituyen múltiples columnas de HPLC | |||
  Este
dúo puede substituir múltiples columnas de HPLC como las de Fase Reversa
(RP), Fase Reversa modificada (AQ), columnas RP con Grupo Polar
Incrustado, Fase Normal (NP), Intercambio Catiónico (SCX), Intercambio
Aniónico (SAX), Exclusión Iónica (SEC) e Interacción Hidrofílica (HILIC).
El desarrollo de
Métodos se simplifica usando sólo dos columnas OBELISC y algunas fases
móviles simples compatibles con MS o bajo UV (<220 nm).
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| Obelisc R y Obelisc N - Dos interacciones diferentes | |||
 
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| Obelisc R y Obelisc N - Un potente Duo para HPLC | |||
 El
uso de las celdas de separación líquida de Obelisc en las separaciones
cromatográficas permite resultados muy diferentes que el de otras
columnas cromatográficas. La carga y la conformación son propiedades
ajustables que permiten dramáticos cambios en la selectividad de la
separación. El desarrollo de métodos es ahora una ciencia experimental
más que una selección de columnas tipo prueba-error. La figura muestra la separación de una mezcla con fases móviles similares en Obelisc N y R. El orden de elución de los picos se invierte cambiando sólo la cantidad de acetonitrilo presente en la fase móvil. El propil paraben, hidrofóbico, se retiene mucho más en Obelisc R debido a las características de Fase Reversa (RP) de la columna. Los compuestos polares, dopamina y DOPA se retienen mucho más en Modo Normal (NP) en Obelisc N. |
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| Elevada capacidad de carga de la fase Obelisc | |||
 Las
columnas Obelisc tienen una elevada densidad de iones positivos y
negativos en la superficie de la fase estacionaria. Esta característica permite usar columnas Obelisc en cromatografía preparativa pues su capacidad de carga para compuestos ionizados es superior en un factor de 10 a las columnas tradicionales de Fase Reversa. Para los compuestos neutros, sin embargo, la capacidad de carga es similar a otras columnas RP. Al disponer de dos cargas opuestas, las columnas Obelisc retienen compuestos polares sin el uso de reactivos de par iónico, y permiten el uso de una concentración de fase orgánica mucho mayor en la retención de compuestos polares que las columnas tradicionales de RP. |
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| Publicaciones Disponibles en Obelisc | |||
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Promix es una
tecnología cromatográfica alternativa que permite una resolución
eficiente de péptidos y proteínas. Esta tecnología se basa en la
combinación de dos interacciones: hidrofóbica e iónica. Este enfoque
resulta posible debido a un nuevo tipo de fase estacionaria que resulta
de la combinación de grupos funcionales hidrofóbicos e iónicos en un
ligando unido al soporte de sílice. Con esta fase puede conseguirse una
capacidad de carga y selectividad incomparable. El ajuste independiente
de la cantidad de tampón y modificador orgánico crea un número infinito
de condiciones de separación que resultan adecuadas para muchos tipos de
biomoléculas. Ventajas y Beneficios
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| El control de la concentración del tampón ácido y del modificador orgánico permite un control casi ilimitado de la retención y selectividad. | ||
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| Selectividad Alternativa de Promix TM vs. Columnas RP 300 Å | ||
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| Digeridos de Péptidos y Proteínas | ||
 La selectividad de un
digerido de albúmida depende de la concentración de tampón.Las mezclas complejas como los digeridos de proteínas muestran perfiles diferentes a diferentes fuerzas iónicas. Se pueden utilizar gradientes múltiples en muestra complejas, del tipo de:
Cada modo permite una selectividad y un perfil de elución diferente. |
 Péptidos y Proteínas. Separación de una Mezcla compleja. La Separación de una mezcla compleja que contenga péptidos muy pequeños y péptidos muy grandes puede conseguirse con dos columnas Promix. Los péptidos más pequeños que eluyen en los primeros 1.5 minutos en una columna Promix MP se recolectan y se resuelven en una columna Promix SP |
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| El ajuste independiente de la cantidad de tampón y modificador orgánico crea un número infinito de condiciones de separación | ||
De manera similar a la
separación de iones tradicional, la concentración de tampón juega un
papel importante en la tecnología de modo mixto, alterando el grado de
interacción iónica de las biomoléculas con la fase estacionaria. La
cantidad de modificador orgánico resulta importante para cambiar el
grado de interacción hidrofóbica. El ajuste independiente de ambas
cantidades crea un número infinito de condiciones de separación
adecuadas para muchos tipos de biomoléculas. En general se pueden
obtener tres tipos de modos de separación en gradiente:
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| Aplicaciones en ProMix |
Tamaño kB |
Descargar |
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| Análisis de Insulinas Sintéticas y Humanas en Promix MP | 58 |
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| Análisis de Polietilénimina en Plasma en Promix MP | 56 |
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| Publicaciones disponibles en Promix | |||
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Enter a New Era in Biomolecule Analysis with Promix Columns. 282 Kb |
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