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Columnas ThermoFisher Acclaim para Glicanos |
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Columnas Dionex Acclaim GlycanPac AXR-1 |
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Análisis de Glicanos por HPLC de Alta Resolución con GlycanPac AXR-1La columna Thermo Scientific™ GlycanPac™ AXR-1 es una columna de altas prestaciones basada en sílice que permite la separación simultánea de glicanos por carga, tamaño e isomerismo. Ha sido diseñada para análisis rápidos de alta resolución y velocidad con una selectividad única frente a los glicanos biológicamente importantes tanto nativos como marcados mediante detección por Fluorescencia o MS. GlycanPac™ AXR-1 puede utilizarse para la caracterización cualitativa, cuantitativa y estructural de glicanos cargados y neutros presentes en moléculas biológica (p.e. proteínas).
GlycanPac™ AXR-1, basada en una química innovadora de superficie de modo mixto, combina los mecanismos de retención tanto de intercambio aniónico débil (WAX) como de Fase Reversa para una selectividad y poder resolutivos óptimos. La funcionalidad WAX genera retención y selectividad para los glicanos cargados negativamente, mientras que el modo RP facilita la separación de glicanos de la misma carga según su tamaño e isomerismo. Como resultado la columna GlycanPac™ AXR-1 ofrece capacidades incomparables para la separación de glicanos tanto en HPLC como en UHPLC con detección LC-FL y LC-MS con tampones acuosos volátiles (p.e. acetato o formiato de amonio) y acetonitrilo, que permite que los glicanos eluidos puedan ser analizados de inmediato por MS. Las columnas GlycanPac™ AXR-1 usan substratos de sílice esférica de alta pureza tanto en 1.9 como en 3 mm para aplicaciones en UHPLC y HPLC estándar y se suministran en varias configuraciones para acomodarse a aplicaciones con diferentes necesidades de resolución, velocidad e instrumentales. La caracterización estructural de cada glicano determinado en la columna GlycanPac™ AXR-1 se determina mediante datos de fragmentación MS/MS y análisis estructural con el software SimGlycan®. En muchos casos algunas estructuras de oligosacáridos aparecen idénticas por m/z y carga, pero eluyen en posiciones ligeramente diferentes en el gradiente. En muchos casos los resultados por MS describen completamente a los isómeros pero en otros los datos resultan insuficientes para elucidar completamente el enlace o ramificación de los isómeros. El hecho de que aparezcan en MS con valores m/z idénticos en HRAM (High Resolution Accurate Mass) pero que eluyan a tiempos diferentes indican que son isómeros. Los datos muestran claramente que la columna GlycanPac™ AXR-1 (con 73 picos que contienen 135 glicanos) resuelven y permite la identificación por MS de muchos más glicanos que con la columna Amide Hilic comercial de 1.7 μm (ACQUITY UPLC® BEH Amide, 2.1 x 150 mm, 1.7 μm) que resuelve muchos menos picos que contienen glicanos en los que estos compuestos de carga diferente coeluyen muchas veces. Ver Artículo Técnico.
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N-Glicanos marcados 2AA con GlycanPac AXR-1 de 1.9 mm | N-Glicanos marcados 2AB con GlycanPac AXR-1 de 1.9 mm |
Especificaciones Dionex GlycanPac AXR-1 | |
Rango Temperatura | Ambiente - <60ºC. |
Compatibilidad Fase Móvil | pH 2.0-8.0. |
Composición substrato | Sílice de alta pureza prososa esférica. Substrato WAX e RP de modo mixto. 1.9 y 3 mm. 175 Å. 220 m2/g |
Presión Operativa Máxima 1.9 mm | 10000 psi (68.9 MPa) 2.1x100mm, 15000 psi (103.4 MPa) 2.1x150mm, 6000 psi (41.4 MPa) 2.1x250mm |
Presión Operativa Máxima 3.0 mm | 7000 psi (48.3 MPa) |
Caudal recomendado 1.9 mm | 0.2 a 0.4 mL/min para todas las columnas de 2.1mm |
Caudal recomendado 3.0 mm | 0.8 a 1.2 mL/min para 4.6mm, 0.3 a 0.6 mL/min para 3.0mm, 0.1 a 0.3 mL/min para 2.1mm |
Columnas y Pre Columnas Dionex GlycanPac AXR-1 | |
088255 | GlycanPac AXR-1, 3 µm Columna Analítica 4.6 × 150 mm |
088252 | GlycanPac AXR-1, 3 µm Columna Analítica 3.0 × 150 mm |
088251 | GlycanPac AXR-1, 3 µm Columna Analítica 2.1 × 150 mm |
088135 | GlycanPac AXR-1, 1.9 µm Columna Analítica 2.1 × 250 mm |
088136 | GlycanPac AXR-1, 1.9 µm Columna Analítica 2.1 × 150 mm |
088260 | GlycanPac AXR-1, 3 µm, pre columna 4.6x10, pk 2. usar Holder V-2) |
088259 | GlycanPac AXR-1, 3 µm, pre columna 3.0x10, pk 2. usar Holder V-2) |
088258 | GlycanPac AXR-1, 3 µm, pre columna 2.1x10, pk 2. usar Holder V-2) |
069580 | Holder V-2 |
069707 | Kit V-2 (Holder+Acoplador) |
074188 | Acoplador V-2 columna a precolumna |
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